- ZHV F;TANG X;XIAO S;陈思洁;
家蚕Bmtutl-519蛋白是家蚕Turtle蛋白的一个亚型,属于免疫球蛋白超家族。在家蚕微孢子虫感染BmN细胞后,Bmtutl-519的相对表达水平明显上调。在BmN细胞中,通过间接免疫荧光分析(indirect immunoinfluscent assay,IFA)、共定位实验、蛋白印迹法以及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合载体转染Bmtutl-519表达质粒来研究Bmtutl-519的亚细胞定位。结果表明,Bmtutl-519在BmN细胞的细胞质和细胞膜中均有分布。Bmtutl-519可能作为细胞表面受体或调控因子参与了家蚕微孢子虫的感染过程。Bmtutl-519与家蚕微孢子虫壁蛋白NbSWP26(参与宿主细胞粘附和感染过程)的相互作用分析表明,NbSWP26的C端肝素结合基序(heparin-binding motif,HBM)介导了这两种蛋白之间的相互作用。在将NbSWP26的赖氨酸突变为甘氨酸(K208G、K209G、K210G和K213G)的突变型中,NbSWP26蛋白中HBM的突变导致其结合Bmtutl-519蛋白的能力丧失。微孢子虫粘附和感染试验表明,Bmtutl-519增强了家蚕微孢子虫与宿主细胞表面的结合能力,但并没有增强家蚕微孢子虫对宿主细胞的感染能力。相反,在BmN细胞中,Bmtutl-519的持续高表达抑制了家蚕微孢子虫的增殖。
2019年02期 v.56 68页 [查看摘要][在线阅读][下载 659K] [下载次数：27 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - GUO H Z;XU G W;WANG B;陈思洁;
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)具有细胞质亚型(PEPCK-C)和线粒体亚型(PEPCK-M)两种亚型。PEPCK-C在糖异生过程中起重要作用,而PEPCK-M的功能在很大程度上是未知的。在这项研究中,西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室郭惠珍等人克隆了鳞翅目模式生物家蚕(Bombyx mori)的两种PEPCK亚型(BmPEPCK-1和BmPEPCK-2,两种都是PEPCK-M)。在家蚕基因组中,Bm PEPCK-1和Bm PEPCK-2位置相邻,且均含有13个外显子。Bm PEPCK-1和Bm PEPCK-2序列的主要差异在于第13个外显子序列和3'UTR区。Bm PEPCK-1的表达量高于Bm PEPCK-2,但其过表达不影响BmNPV增殖。在BmNPV感染后,Bm PEPCK-2和自噬相关蛋白ATG6/7/8/13的表达水平均降低。Bm PEPCK-2的过表达增加了ATG6/7/8的表达并显著降低了BmNPV病毒荧光数量和含量,表明BmPEPCK-2可以通过增加ATGs表达来抑制BmNPV的增殖。这些结果表明PEPCK-M在抗病毒免疫中具有重要作用。
2019年02期 v.56 68页 [查看摘要][在线阅读][下载 659K] [下载次数：28 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - YASUHIKO M;MASAKI I;SETSUO H;孙涛;
很多疾病与人们生活方式相关,如过量摄入蔗糖会引起高血糖、糖尿病。给小鼠注射一种乳酸菌可以抑制蔗糖引起的高血糖,但在人类临床试验中没有类似效果。来自东京大学医学研究所的学者研究发现,用家蚕筛选系统鉴定的粪肠球菌YM0831,可以抑制人体内蔗糖引起的高血糖,同时在家蚕中粪肠球菌YM0831能抑制葡萄糖引起的高血糖。粪肠球菌YM0831可以抑制人体内肠上皮细胞Caco-2对葡萄糖的吸收,粪肠球菌YM0831转座子插入突变会导致其抑制活性降低,在家蚕体内蔗糖和葡萄糖引起的高血糖抑制活性也均降低。在人类临床试验中,口服粪肠球菌YM0831抑制了蔗糖引起的血糖升高。以上结果表明,粪肠球菌YM0831可以抑制人体内肠道葡萄糖转运,抑制蔗糖引起的高血糖。
2019年02期 v.56 68-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 671K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - WANG Y;ZHAO Q;WAN Q X;孙涛;
家蚕性别决定基因(Bmdsx)在家蚕性别决定的最后一步中起到双开关基因的作用。西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室的学者研究发现,家蚕P因子抑制(PSI)蛋白能够发挥外显子沉默作用,与Bmdsx前体mRNA顺式作用元件CE1相互作用,促进Bmdsx的雄性特异性剪接。然而,BmPSI蛋白与Bmdsx前体m RNA相互作用的机制尚不清楚。电泳迁移率转移实验(EMSA)结果表明,BmPSI中4个KH_1基序都是结合的关键,尤其是前两个KH_1基序。通过EMSA、圆二色性(CD)光谱学和等温滴定量热法(ITC)实验,发现KH_1基序中的3个活性位点(I116、L127和IGGI)是结合所必需的。作者纯化了斜纹夜蛾的PSI同源蛋白(SlPSI),并验证了SlPSI与顺式作用元件CE1的结合。与BmPSI相比,I116和IGGI突变的SlPSI蛋白失去了与顺式作用元件CE1结合的能力。综上所述,PSI和dsx前体mRNA的结合在家蚕和斜纹夜蛾中是保守的,这些发现为鳞翅目昆虫的性别鉴定提供了线索。
2019年02期 v.56 69页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K] [下载次数：20 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - HU Z;DONG Z;DONG F;白艳敏;
丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(PP2A)是2型蛋白磷酸酶之一,该酶是许多细胞内生理过程和病原菌感染所必需的。然而,PP2A在家蚕体内的功能尚不清楚。在本文中,西南大学的HU等人克隆并鉴定了Bm PP2A,是一种来自家蚕的PP2A基因,其具有两个HEAT结构域并且与来自其他生物的PP2A具有高度相似性。结果表明,Bm PP2A定位于家蚕细胞质中,在家蚕表皮和中肠中均有高表达,家蚕核多角体病毒(BmNPV)感染可诱导Bm PP2A表达下调。除此之外,通过过表达上调Bm PP2A可显著抑制BmNPV的增殖。相反,通过RNA干扰和PP2A抑制剂治疗下调Bm PP2A,可增加BmNPV的复制。这是PP2A在家蚕中具有抗病毒作用的首次报道,为深入了解Bm PP2A的功能和潜在的抗BmNPV机制以及为可能的家蚕抗性品系育种目标提供了思路。
2019年02期 v.56 69页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K] [下载次数：23 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - HAQUE M;HIROWATARI A;KOYANAQI A;白艳敏;
日本福冈九州大学的HAQUE等人从家蚕中发现并鉴定了一个负责Ⅰ-丝氨酸生物合成的磷酸化丝氨酸氨基转移酶(BmPSAT)。HAQUE等人通过逆转录酶-聚合酶反应克隆了编码BmPSAT的互补DNA并进行了测序。发现假定的氨基酸序列与来自昆虫、人、植物和细菌的已知PSAT序列显示出47%～87%的同源性。另外通过系统发育分析,发现BmPSAT与昆虫的PSAT具有进化关系。于是HAQUE等人利用冷休克启动子在大肠杆菌中制备重组BmPSAT,并对其进行纯化。发现这种酶利用磷酸羟基丙酮酸和谷氨酸进行转氨作用。BmPSAT在包括丝腺在内的几种标准家蚕组织中表达水平较高,而丝氨酸缺乏的家蚕丝腺中表达水平较低。这些结果表明,BmPSAT可能在家蚕幼虫Ⅰ-丝氨酸的合成和供应中发挥重要作用。
2019年02期 v.56 69-70页 [查看摘要][在线阅读][下载 605K] [下载次数：12 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - GU S H;LIN P L;HSIEH H Y;刘露露;
国家自然科学博物馆生物学系之前的研究表明,糖原合成酶激酶(GSK)-3β的磷酸化与家蚕胚胎滞育过程有关。然而,其上游信号通路还不清楚。在此研究中,他们探究了家蚕蚕素/Akt信号与家蚕胚胎滞育过程的关系。结果表明,一种特异性磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002阻断了由去卵壳引起的GSK-3β磷酸化,表明在去卵壳的卵中,PI3K参与了GSK-3β的磷酸化。Akt磷酸化的直接测定表明,去卵壳刺激Akt磷酸化,Ly294002阻断Akt磷酸化。Akt磷酸化随时间而变化表明滞育和发育卵之间存在不同的变化模式。与同等时期的滞育卵相比,非滞育卵产卵后第3 d和第5 d的Akt磷酸化水平相对较高。HCl处理后,卵内AKT磷酸化水平相较于滞育卵表现出较晚和更宽的峰。对家蚕蚕素-Z1基因表达水平的检测发现,在滞育卵产卵后1 d出现一个高峰,第2 d则急剧下降。然而,在非滞育和HCl处理的卵中,在产卵后的1 d～4 d发现一个宽峰。胚胎期家蚕蚕素-Z1基因表达水平变化与Akt磷酸化的变化相一致,表明家蚕蚕素-Z1可能是Akt磷酸化的上游信号成分。综上所述,他们的研究结果表明,PI3K/Akt是GSK-3β磷酸化的上游信号通路,并与家蚕胚胎滞育过程有关。这是首次证明家蚕蚕素/Akt信号与胚胎滞育过程之间具有潜在相关性的研究。
2019年02期 v.56 70页 [查看摘要][在线阅读][下载 593K] [下载次数：35 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - WANG X;LI Y;LIU Q;TAN X;刘露露;
菲氏腺,也被称为Lyonet腺,实际上是一对鳞翅目昆虫特有的小腺体。研究学者尽管已经充分了解了Filippi腺体的超微结构,但该丝腺在纺丝中的特定生物学功能仍不清楚。以前的研究提出了一个假设,即这个腺体可以合成并分泌一些物质进入前部丝腺(ASG)以帮助纺丝。为了鉴定这些代谢物,西南大学家蚕国家重点实验室的赵萍课题组引入了基于GC/MS的代谢组学技术。在饲养和吐丝阶段,从家蚕幼虫的腺体中总共鉴定出59种代谢物,包括脂肪酸,氨基酸和糖。丰度和通路分析表明,这些代谢物在腺体发育和纺丝过程中具有不同的丰度,它们可能促进小分子和离子的运输。最有趣的结果是,菲氏腺在纺丝过程中具有非常活跃的脂肪酸合成过程,暗示了它可以合成脂质或蜡并将它们分泌到ASG中以促进纺丝。这些数据为家蚕和其他鳞翅目昆虫的菲氏腺的生物学功能提供了有益的参考。
2019年02期 v.56 70页 [查看摘要][在线阅读][下载 593K] [下载次数：20 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]